elisa的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其活性,酶标记的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的或抗原)与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,酶联elisa试剂盒公司,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率---,间接地放大了反应的结果,使测定方法达到---的敏感度。 elisa可用于测定抗原,也可用于测定。
然而,影响elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应,所以任何的诊断剂离不开好的原料,如抗原,酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原,而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的,而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,山西酶联elisa试剂盒,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
1 洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,酶联elisa试剂盒厂家,拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染。
2 底物污染,未避光保存,出现颜色 弃去底物,重新配置
3 样品稀释液污染 弃去稀释液,重新配置
4 吸头重复使用,未洗净或消毒不 吸头尽可能---使用
5 不正确的孵育时间,温度(尤其是底物孵育的时间) 常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。完全按照说明书要求。
6 偶联抗体(streptavidin-hrp)浓度过高 按照说明书调整到合适
7 elisa板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃;使用结合力低点的elisa板
8 没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9 样本溶血--- 建议使用非溶血或轻微溶血样本,---溶血样本会导致背景偏高。
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