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    2022-8-18

李峻峰
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亲和柱亲和层析的基本原理

亲和层析是一种吸附层析,湖南---b12亲和柱,抗原(或)和相应的(或抗原)发生特---结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。

所以将抗原(或)固相化后,就可以使存在液相中的相应(或抗原)选择性地结合在固相载体上,---b12亲和柱报价,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。此法具有有效、快速、简便等优点。



亲和柱的测定原理

亲和柱,吸附力高柱容量大,适合于和hplc、lc-ms及don酶免分析试剂盒结合使用,定量检测don。适用于谷物、饲料等样本中的don净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

测定的基础是抗原反应,抗------(don)的连接在柱内凝胶介质上,样品中的don经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过don亲和柱,在亲和柱内,don与结合,洗涤液通过亲和柱除去未被结合的杂质。之后洗脱don,然后进行相关分析。



亲和柱净化步骤

注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!

----3ml柱管取出上方堵头,减去上堵头螺纹下---部分,插回柱子上,另一端与20ml针筒固定后使用;将1ml柱管上方堵头取出后斜剪断,然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象,不影响亲和柱的使用);

----准确移取上述混匀滤液,---b12亲和柱,注入针筒中,调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过亲和柱;

----用20ml 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液,先用10ml 0.1%吐温20-pbs清洗,再用10 ml 10%水冲洗柱子,---b12亲和柱厂家,之后用10ml水冲洗柱子。),流速1秒/滴,弃去流出液,直至2~3ml空气通过柱体,---柱子内没有残余液体;

----准确加入1.5ml(色谱级)洗脱,流速自然重力,直至2~3ml空气通过柱体,---柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液,进行相关测定。



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